1.Nuôi cấy tế bào là gì?
Nuôi cấy tế bào đề cập đến việc loại bỏ các tế bào từ động vật hoặc thực vật và sau đó phát triển chúng trong môi trường nhân tạo thuận lợi.Các tế bào có thể được lấy trực tiếp từ mô và được phân hủy bằng enzym hoặc phương tiện cơ học trước khi nuôi cấy, hoặc chúng có thể được lấy từ các dòng tế bào hoặc dòng tế bào đã được thiết lập.
2. Nuôi cấy sơ cấp là gì?
Nuôi cấy sơ cấp đề cập đến giai đoạn nuôi cấy sau khi các tế bào được tách ra khỏi mô và sinh sôi nảy nở trong các điều kiện thích hợp cho đến khi chúng chiếm tất cả các chất nền có sẵn (nghĩa là đạt đến điểm hợp lưu).Ở giai đoạn này, các tế bào phải được cấy chuyền bằng cách chuyển chúng sang một thùng chứa mới với môi trường tăng trưởng mới để cung cấp thêm không gian cho sự phát triển tiếp tục.
2.1 Dòng tế bào
Sau lần nuôi cấy con đầu tiên, quá trình nuôi cấy sơ cấp được gọi là dòng tế bào hoặc dòng con.Các dòng tế bào bắt nguồn từ các nền văn hóa sơ cấp có tuổi thọ giới hạn (tức là chúng bị giới hạn; xem bên dưới) và khi chúng vượt qua, các tế bào có khả năng tăng trưởng cao nhất sẽ chiếm ưu thế, dẫn đến một mức độ nhất định của kiểu gen trong quần thể phù hợp với kiểu hình.
2.2 Biến dạng tế bào
Nếu một quần thể con của một dòng tế bào được chọn tích cực từ môi trường nuôi cấy bằng cách nhân bản hoặc một số phương pháp khác, thì dòng tế bào đó sẽ trở thành một dòng tế bào.Các dòng tế bào thường thu được những thay đổi di truyền bổ sung sau khi dòng bố mẹ bắt đầu.
3. Dòng tế bào giới hạn và liên tục
Các tế bào bình thường thường chỉ phân chia một số lần giới hạn trước khi mất khả năng sinh sôi nảy nở.Đây là một sự kiện được xác định về mặt di truyền được gọi là tuổi già;những dòng tế bào này được gọi là dòng tế bào hữu hạn.Tuy nhiên, một số dòng tế bào trở nên bất tử thông qua một quá trình gọi là biến đổi, quá trình này có thể xảy ra một cách tự phát hoặc do hóa chất hoặc vi rút gây ra.Khi một dòng tế bào hữu hạn trải qua quá trình biến đổi và có khả năng phân chia vô hạn, nó sẽ trở thành một dòng tế bào liên tục.
4. Điều kiện văn hóa
Điều kiện nuôi cấy của mỗi loại tế bào rất khác nhau, nhưng môi trường nhân tạo để nuôi cấy tế bào luôn bao gồm một giá thể thích hợp, trong đó có các thành phần sau:
4.1 Cơ chất hoặc môi trường nuôi cấy cung cấp các chất dinh dưỡng thiết yếu (axit amin, carbohydrate, vitamin, khoáng chất)
4.2 Yếu tố tăng trưởng
4.3 Nội tiết tố
4.4 Khí (O2, CO2)
4.5 Môi trường lý hóa điều hòa (pH, áp suất thẩm thấu, nhiệt độ)
Hầu hết các tế bào phụ thuộc vào neo và phải được nuôi cấy trên chất nền rắn hoặc bán rắn (nuôi cấy kết dính hoặc nuôi cấy đơn lớp), trong khi các tế bào khác có thể phát triển nổi trong môi trường (nuôi cấy huyền phù).
5. Bảo quản lạnh
Nếu có tế bào thừa trong quá trình cấy chuyền, thì chúng phải được xử lý bằng chất bảo vệ thích hợp (chẳng hạn như DMSO hoặc glycerol) và được bảo quản ở nhiệt độ dưới -130°C (bảo quản lạnh) cho đến khi cần sử dụng.Để biết thêm thông tin về cấy chuyền và bảo quản lạnh tế bào.
6. Hình thái tế bào nuôi cấy
Các tế bào trong nuôi cấy có thể được chia thành ba loại cơ bản dựa trên hình dạng và bề ngoài của chúng (tức là hình thái học).
6.1 Các tế bào nguyên bào sợi lưỡng cực hoặc đa cực, có hình dạng thon dài và phát triển gắn liền với chất nền.
6.2 Các tế bào giống như biểu mô có hình đa giác, kích thước đều đặn hơn và được gắn vào chất nền trong các tấm rời rạc.
6.3 Các tế bào giống như nguyên bào bạch huyết có hình cầu và thường mọc ở dạng huyền phù mà không bám vào bề mặt.
7.Ứng dụng nuôi cấy tế bào
Nuôi cấy tế bào là một trong những công cụ chính được sử dụng trong tế bào và sinh học phân tử.Nó cung cấp một hệ thống mô hình tuyệt vời để nghiên cứu sinh lý và hóa sinh bình thường của tế bào (chẳng hạn như nghiên cứu trao đổi chất, lão hóa), tác dụng của thuốc và các hợp chất độc hại trên tế bào, tác động gây đột biến và gây ung thư.Nó cũng được sử dụng để sàng lọc và phát triển thuốc và sản xuất quy mô lớn các hợp chất sinh học (chẳng hạn như vắc-xin, protein điều trị).Ưu điểm chính của việc sử dụng nuôi cấy tế bào cho bất kỳ ứng dụng nào trong số này là tính nhất quán và khả năng tái tạo của các kết quả có thể thu được bằng cách sử dụng một loạt các tế bào được nhân bản.
Thời gian đăng: Jun-03-2019